大鼠elisa检测试剂盒各个操作方法

大鼠elisa检测试剂盒注意事项：

为保证得到理想的实验结果在使用此试剂盒之前请认真阅读该注意事项。

1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2.Annexin V-FITC和Propidium iodide是光敏物质，在保存与操作时请注意避光。

3.Propidium iodide（PI）能通过皮肤吸收，对眼睛有刺激作用。

4.在细胞洗涤的zui后一步，请尽量将上清弃净，以免PBS残留影响实验结果。

 5.PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高，建议首*行Annexin V-FITC染色，上机前5分钟再加入PI染色。

6.整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作。

7.反应完毕后请尽快检测，因为细胞凋亡是一个动态的过程，反应1小时后荧光强度就开始衰变。

8.成功的检测凋亡受以下几种因素的影响，如细胞类型、细胞膜上PS的密度、发生凋亡时PS翻转的比例、诱导细胞凋亡的方法、所用试剂、诱导凋亡的时间等，把这些影响因素进行优化对实验成功是非常必要的。

大鼠elisa检测试剂盒操作注意：

1.不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同，务必按照所用人ELISA试剂盒说明书严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性.

2.若不同批号人ELISA试剂盒的不同组分(A液或酶工作液)，或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。

3.反应时间的误差，做大量标本时，一孔和后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。

4.临界值附近标本波动为正常现象，任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。

5.加样时样品量误差，对于阴或很阳的标本影响不大，但对阈值附近的标本影响，建议校对加样器。