上海邦景实业有限公司作者
白介素elisa检测试剂盒检测程序:
1. 建立标准曲线:设标准孔8孔,每孔中各加入样品稀释液100ul,*孔加标准品100ul,混匀后用加样器吸出100ul,移至第二孔。如此反复作对倍稀释至第六孔,zui后,从第六孔中吸出100ul弃去。第七孔为空白对照,第八孔为零孔。
2. 加样:待测品孔每孔各加入待测样品100ul混匀。
3. 将反应板充分混匀后粘上封板纸置37 oC 120分钟。
4. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。
5. 每孔(除零孔)加*抗体工作液50ul,置37℃ 60分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔(除零孔)加酶标抗体工作液100ul(两滴),将反应板置37 oC 60分钟。
8. 洗板:同前。
9. 每孔加入底物液A、B各一滴,置37 oC避光反应15分钟。
10. 每孔加入1滴终止液混匀。
11. 在450nm处测吸光值。
白介素elisa检测试剂盒样本处理:
1、血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

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