小鼠Elisa试剂盒2大注意事项的几点

小鼠Elisa试剂盒操作方法：

　　1.包被抗体：用包被缓冲液稀释特异性抗体球蛋白至*适浓度（1～10μg/ml），每凹孔加0.3ml，4℃过夜，或37℃水浴3小时，贮存冰箱。

　　2.洗涤：移去包被液，凹孔用洗涤缓冲液（含0.05%吐温-20）洗3次，每次5分钟。

　　3.分2组，a组加酶标记抗原和被检抗原混合液0.2ml，b组只加酶标记抗原液0.2ml，37℃作用1～2小时。（混合液可作成不同稀释度）

　　4.洗涤：移去包被液，凹孔用洗涤缓冲液（含0.05%吐温-20）洗3次，每次5分钟。

　　5.加入0.2 ml底物溶液于每个凹孔（OPD或OT），室温作用30分钟（另作一空白对照，0.4ml底物加0.1ml终止剂）。

　　6.加终止剂：每凹孔加2M H2SO4或2M柠檬酸0.05ml。

　　7.用酶标比色计测定a、b两组OD值，并求出a、b、OD值的差数。

小鼠Elisa试剂盒注意事项：

1、需求*保存的兔血清有必要储存于-20℃ - 兔血清-70℃ 低温冰箱中，4℃冰箱中保存时间切勿超越1月，由于血清结冰时体积会添加约10%，因而，血清在冻入低温冰箱，有必要预留定体积空间，否则易产生污染或玻璃瓶冻裂。

2、瓶装血清冻结需选用逐步冻结法：-20℃ 至 -70℃ 小鼠Elisa试剂盒低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天，然后移入室温，待悉数溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(当心勿形成气泡)，使温度与兔血清成分均一，减少沉积的产生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃冻结，因温度改动太大，容易形成蛋白质凝集而呈现沉积。 

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