土壤酸性磷酸酶活性测定试剂盒-齐一生物

土壤酸性磷酸酶（soil acid phosphatase S-ACP）活性

测定试剂盒说明书

For Research Use only

仅供研究用

货号：QYS-235098

分光光度法 50 管/48 样

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定

测定意义

土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和 pH 显著影响，根据zui适 pH 范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。

测定原理

酸性环境中 S-ACP 催化磷酸苯二钠水解生成*和*，通过测定酚的生成 即

算出 S-ACP 活性。

自备仪器和用品

见分光光度光度计、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯。

试剂组成和配制

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粗酶液提取：

称取风化混匀土壤约 0.1g，加入 50µL 甲苯（自备），轻摇 15min；加 0.4mL 试剂一并且摇匀后，置于 37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应 24h；到时后迅速加入 1mL 试剂二充分混匀， 以终止酶催化的反应。8000g，25℃离心 10min，取上清液置于冰上待测。

测定步骤

1.分光光度计预热 30 min，调节波长到 660 nm，蒸馏水调零。

2.空白管：取1mL 玻璃比色皿，加入 50 µL 蒸馏水，100 µL 试剂三，20 µL 试剂四，充分混匀， 显色后再加蒸馏水 830 µL，混匀后 25℃静置 30 min，于 660 nm 测定吸光度，记为 A空白管。

3.标准管：取1mL 玻璃比色皿，加入 50 µL 标准液，100 µL 试剂三，20 µL 试剂四，充分混匀， 显色后再加蒸馏水 830 µL，混匀后 25℃静置 30 min，于 660 nm 测定吸光度，记为 A标准管

4.测定管：取1mL 玻璃比色皿，加入 50 µL上清液，100 µL 试剂三，20 µL 试剂四，充分混匀， 显色后再加蒸馏水 830 µL，混匀后 25℃静置 30 min，于660 nm 测定吸光度，记为 A测定管。

注意 空白管和标准管只需测定一次

S-ACP 活性计算公式

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