土壤蔗糖酶检测试剂盒资料-齐一生物

土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC）试剂盒说明书
For Research Use Only
仅供研究用
货号：QYS-235096
分光光度法 50 管/24 样

土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC）试剂盒说明书测定意义：

S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收，其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度密切关，是评价土壤肥力的重要指标。
测定原理：

S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与 3，5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在 510nm 有特征光吸收，在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与 S-SC 活性成正比。
自备用品：

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前每瓶加入 40mL 蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存；
试剂四：液体 30mL×1 瓶，4℃保存。
土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC）试剂盒说明书测定步骤和加样表：

试剂名称    测定管        对照管
                    
风干土样（g）    0.1            0.1
试剂一（μL）    15            15
振荡混匀，使土样全部湿润，37℃水浴 15min    
试剂二（μL）        250            250
试剂三（μL）        750            
蒸馏水（μL）                    750
                    

充分混匀，放入 37℃水浴培养 24 小时，10000 g，4℃，离心 5min，取上清液

上清液（μL）    200    200
试剂四（μL）    500    500

充分混匀，放入沸水浴中煮沸 5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀，蒸馏水稀释 10 倍后（可以吸取 100μL，加入 900μL 蒸馏水稀释；如果吸光度大于 4，可以适当加大稀释倍数），510nm 处蒸馏水调零，读吸光值 A。计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。

S-SC 活性计算：

标准条件下测定的回归方程为 y = 4.9x -0.062；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 S-SC 活力单位。
S-SC 活力(U /g 土样)=( ΔA+0.062) ÷4.9×10×V 反总÷W÷T =20.7×(ΔA+0.062) 10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V 反总：反应体系总体积：1.015mL；W：样本质量，