BSA标准曲线的制作方法及常见问题

1.为什么BSA可以用来做标准曲线而不是选其他蛋白?
答：分子量68KD。BSA用的多主要是便宜，其他一些纯蛋白是非常贵的，差价几万倍都是可能的。

2、选择应用考马斯亮蓝方法测蛋白质量，做BSA标准曲线步骤时已经测得梯度蛋白量的吸光值。想求助：在excel中怎样做标准曲线？
答：将蛋白质浓度放在一列，相应的吸光度放在一列，将两列选中后，选择插入图形，选散点图，然后在插入的图形上的点右击选择添加趋势线，并勾选显示公式和R值，即可得到方程式。
用梯度蛋白量和吸光值先做出散点图，然后点击选中直线，在直线处点击鼠标左键，出现“添加趋势线”，点击进入，在“类型”菜单中选择“线性”，在“选项”菜单中选择“显示公式”“显示R2值”，点击“确定”，图中即出现线性方程和R2，此方程即为标准曲线方程。

3、如何测BSA的标准曲线?配置BSA标准溶液时，需要浓度到小数点后四位吗?
答：一般3个9以上就可以了，有的实验室一般认为99.98%就足够。
要注意几点，一个是配置高浓度原液，而后在其基础上稀释；二是充分震荡，每个步骤都要充分震荡；三要选择比较好的蛋白测定试剂盒。

4、BSA是否每次做标准曲线都要重配?
答：不用，可以一批配100ml，然后分装成小管冻存起来，以后每次用的时候取一只，这样可以避免多次配置所产生的差异，使用也方便；书上写一般情况下都是要做标曲的，但是不做的话差别也不是太大，但是要的话还是得做标曲。