检测未知抗体的应用方法是什么?

  恒远生物取长补短“始终将提高产品质量”当做企业经营的生命线，为了科研结果的准确性和可靠性，付出了全部的热情和精力，当然在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有很多种，下面我们与大家分享检测未知抗体的应用方法。

检测未知抗体的应用方法： 
（1）包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml，在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃夜间存储，次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟(简称洗涤，下同)。 
（2）加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时，然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。 
（3）加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml，37℃孵育0.5～1小时，洗涤。 
（4）加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。 
（5）终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 
（6）结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果，反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+"、“-"号表示。
（7）也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处。

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