上海恒远生物科技有限公司作者
问:做出来的结果:标准品的吸光度呈线性回归,但是样品的吸光度都和本体吸光度值接近,正常未予干预的大鼠血浆都基本没有5-HT 表达,这是什么原因?(大鼠5羟色胺(5-HT)Elisa试剂盒)
答:样本、稀释、室控和机器操作等,原因都可能造成吸光度都和本体吸光度值接近,好像荧光法里面有种试剂盒可以检测滴度。
问:标准的检测85个样本的和单孔相比, 有什么好的地方吗?
答:标准的检测又叫复孔检测,标准的检验重复性测的结果好,所以大家都叫复孔是标准的检测。
问: 酶标板分次使用 剩下的建议怎么保持 ?
答:要是真的用不完或标本不多的情况下。做点处理后:板条和板架都是可拆卸的,可以再用之,前拆下4条放置锡箔袋或其他无污染的袋子,放到冰箱 2-8度保存。
问:大鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA,大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5B),我发现试剂盒里缺少标准品稀释液,没有它我的实验无法进行,盒子里面有特殊稀释液是用来稀释样品的,但都没有标准品稀释液,我的样品已超出zui低检测限,所以需要稀释标准品才行吗?
答:特殊稀释液是用来稀释标准品的,特殊稀释液一般情况不用当样本浓度特别高是先用特殊稀释液稀释,标准品需要再稀释就也要用特殊稀释液。
问:比如说我偶然发现只加*的也出现浅黄色,这怎么解释呢?
答:可能的原因是:①洗板时有交叉感染。②*中本身有本底的一个较小的读数。也是ELISA的一个局限性,免疫的很多反应稀释液 洗涤液发挥了很重要的作用,不加的话效果不明显,但是加了以后有些成分可能有一部分的干扰作用,可以比较不同的厂家的盒子 都存在这些局限性的,但不影响zui终的结果,ELISA严格的说就是一个半定量的方法。
问:那标准品出现跳孔是怎么回事?
答:你*可以拿同样的标准品再重新做一次 ,做之前摇匀一下,肯定可以做好 。那是操作问题了 ,你可以再做一次的,之前也有客户出现过类似的问题,学生做了2次都没做好,后来老师自己做,就是摇匀了一下,其他操作都一样,标准曲线做的很。
问:Elisa代测结果表格每组表达什么?
答:S1-S5 代表 标准品*个表格是吸光度 第二个是对应表 第三个是数据处理(是根据标准品那个线性关系出来的)第四个表zui终结果是都乘以5得到的问:为什么×5?答:因为我们做的时候是10ul样本+40ul*做的 问:那个U是代表什么?答:U是调零的,什么都不加。
问:为什么检测结果zui终结果单位表达不一样?
答:ng/ml是质量单位, pmol/L是浓度单位,一般是没法换算的,在采购试剂盒时请用户说明单位,1ng/ml = 1000pg/ml。
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